本發(fā)明涉及一種與酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(acid?sphingomyelinase，asm)蛋白特異性結(jié)合的抗體。
背景技術(shù)：
1、鞘脂代謝調(diào)節(jié)正常的細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，鞘脂代謝的異常變化對包括阿爾茨海默病在內(nèi)的各種神經(jīng)退行性疾病產(chǎn)生影響。酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(acid?sphingomyelinase，asm)蛋白作為調(diào)節(jié)鞘脂代謝的酶，是一種在幾乎所有類型的細胞中表達的蛋白質(zhì)，在鞘脂代謝以及細胞膜周轉(zhuǎn)(turnover)中發(fā)揮重要作用。
2、與正常人相比，酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的活性在如阿爾茨海默病等神經(jīng)退行性疾病患者的大腦中顯著增加。對此，韓國專利授權(quán)第10-1521117號中公開了當(dāng)抑制過表達的酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的活性或抑制酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的表達時，可以抑制β淀粉樣蛋白的積累并改善學(xué)習(xí)能力以及記憶力，從而治療神經(jīng)退行性疾病。并且，最近已知酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的活性在如抑郁癥等神經(jīng)疾病中也增加，因此抑制所述酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的表達或活性具有改善抑郁癥的效果。
3、然而，還沒有開發(fā)出直接抑制酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的表達或活性的物質(zhì)，但是，已鑒定幾種間接抑制酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的表達的抑制劑。例如，有用于治療抑郁癥的三環(huán)類抗抑郁藥(tricyclic?antidepressant)，其包括阿米替林(amitriptyline)、地昔帕明(desipramine)、丙咪嗪(mipramine)等。雖然這些三環(huán)類抗抑郁藥并不是開發(fā)為酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白抑制劑，但通過各種研究結(jié)果證明表現(xiàn)出酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白抑制效果。三環(huán)類抗抑郁藥的主要藥理機制為通過抑制神經(jīng)細胞中神經(jīng)遞質(zhì)的再攝取來增加其活性，確認其作為酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抑制劑的作用為附帶作用。然而，由于三環(huán)類抗抑郁作用于神經(jīng)系統(tǒng)以及神經(jīng)細胞而可能導(dǎo)致視力模糊、光敏感性增加、嘔吐等副作用。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、技術(shù)問題
2、本發(fā)明的一目的在于提供與酸性鞘磷脂酶蛋白特異性結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合片段。
3、本發(fā)明的再一目的在于提供所述抗體或其抗原結(jié)合片段的制備方法。
4、本發(fā)明的還有一目的在于提供所述抗體或其抗原結(jié)合片段的酸性鞘磷脂酶蛋白檢測用途。
5、技術(shù)方案
6、為了實現(xiàn)所述目的，本發(fā)明提供一種與酸性鞘磷脂酶(acid?sphingomyelinase)蛋白特異性結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合片段。
7、并且，本發(fā)明提供一種核酸，其編碼所述抗體或其抗原結(jié)合片段。
8、并且，本發(fā)明提供一種表達載體，其包含所述核酸。
9、并且，本發(fā)明提供一種宿主細胞，其包含所述核酸或表達載體。
10、并且，本發(fā)明提供一種生產(chǎn)與酸性鞘磷脂酶蛋白特異性結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，所述方法包括培養(yǎng)所述宿主細胞以生產(chǎn)抗體或其抗原結(jié)合片段的步驟。
11、并且，本發(fā)明提供一種用于檢測酸性鞘磷脂酶蛋白的組合物及試劑盒，其包含所述抗體或其抗原結(jié)合片段。
12、并且，本發(fā)明提供一種檢測酸性鞘磷脂酶蛋白的方法，所述方法包括將所述抗體或其抗原結(jié)合片段與試樣反應(yīng)的步驟。
13、發(fā)明的效果
14、本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段以特異性地高的結(jié)合力與酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白結(jié)合，從而可以用于檢測酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白或診斷由酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白的過表達引起的疾病。
1.一種與酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白特異性結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合片段。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白來源于哺乳動物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，在由如序列90所示的氨基酸序列組成的多肽中的5個以下氨基酸被取代的重鏈cdr2中，從所述多肽的n-末端起選自由第2位、第4位至第10位、第12位、第13位以及第17位氨基酸組成的組中的5個以下氨基酸被取代。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，由如序列90所示的氨基酸序列組成的多肽中的5個以下氨基酸被取代的重鏈cdr2為由分別如序列95至序列111所示的氨基酸序列組成的多肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，在由如序列93所示的氨基酸序列組成的多肽中的5個以下氨基酸被取代的輕鏈cdr2中，從所述多肽的n-末端起選自由第3位至第7位氨基酸組成的組中的4個以下氨基酸被取代。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，由如序列93所示的氨基酸序列組成的多肽中的5個以下氨基酸被取代的輕鏈cdr2為由分別如序列112至序列135所示的氨基酸序列組成的多肽。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，在由如序列94所示的氨基酸序列組成的多肽中的2個以下氨基酸被取代的輕鏈cdr3中，從所述多肽的n-末端起選自由第6位至第8位氨基酸組成的組中的2個以下氨基酸被取代。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，其特征在于，由如序列94所示的氨基酸序列組成的多肽中的2個以下氨基酸被取代的輕鏈cdr3為由如序列136所示的氨基酸序列組成的多肽。
10.一種核酸，其特征在于，編碼根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的抗體或其抗原結(jié)合片段。
11.一種表達載體，其特征在于，包含根據(jù)權(quán)利要求10所述的核酸。
12.一種宿主細胞，其特征在于，包含根據(jù)權(quán)利要求10所述的核酸或根據(jù)權(quán)利要求11所述的表達載體。
13.一種生產(chǎn)與酸性神經(jīng)鞘磷脂酶蛋白特異性結(jié)合的抗體或其抗原結(jié)合片段的方法，其特征在于，包括培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求12所述的宿主細胞以生產(chǎn)抗體或其抗原結(jié)合片段的步驟。